Igor Stagljar fez carreira construindo ferramentas moleculares para combater o ca¢ncer. Mas quando a pandemia atingiu em mara§o passado, ele direcionou sua experiência para um novo adversa¡rio, o SARS-CoV-2.

Stagljar éprofessor de bioquímica e genanãtica molecular no Donnelly Center for Cellular and Biomolecular Research na Universidade Temerty da Faculdade de Medicina da U of T. Na primavera passada, com o apoio do Toronto COVID-19 Action Fund da Universidade de Toronto, sua equipe começou a desenvolver um novo manãtodo para medir a imunidade ao coronava­rus em pessoas que se recuperaram do COVID-19.

Eles agora estãoprontos para revelar sua criação - um teste de picada de agulha que mede com precisão a concentração de anticorpos do coronava­rus no sangue em menos de uma hora. E ébarato, custando um brinquedo ou cerca de um danãcimo do custo do padrãoouro do mercado.

Seu manãtodo foi publicado em um estudo publicado hoje na revista Nature Communications .

"Nosso ensaio étão sensa­vel, senão melhor do que qualquer outro ensaio dispona­vel atualmente na detecção de baixos na­veis de anticorpos IgG, e sua especificidade, também conhecida como taxa de falso-positivo, étão boa quanto o melhor teste de anticorpos no mercado", disse Stagljar, que colaborou com agaªncias de saúde pública e bancos de sangue de todo o Canada¡ para validar o teste em amostras de sangue colhidas de ex-pacientes do COVID-19.

Os testes sorola³gicos detectam anticorpos, moléculas de protea­na no sangue que reconhecem e neutralizam o Sars-CoV-2 para prevenir a infecção. Esses testes são vistos como uma ferramenta fundamental para os especialistas em saúde pública que desejam medir a imunidade da população para serem mais capazes de controlar a pandemia em curso.

De acordo com um relatório de janeiro da Fora§a-Tarefa Nacional de Imunidade COVID, a maioria dos canadenses permanece vulnera¡vel a  infecção por coronava­rus, com menos de 2% de testes positivos para anticorpos.

Estudos emnívelpopulacional também podem ajudar a revelar a duração da imunidade ao coronava­rus em pacientes que tiveram experiências diferentes da doena§a, de assintoma¡tica a grave. Eles também tem o potencial de revelar onívellimite de anticorpos necessa¡rio para proteção após infecção natural e vacinação.

"Essenívelainda estãopara ser determinado, mas sabemos que as pessoas que foram infectadas com SARS-CoV-2 tem na­veis muito diversos de anticorpos, e não seria surpreendente descobrir que abaixo de algumnívelbasal eles podem não ser protetores ", disse Zhong Yao, pesquisador associado saªnior do laboratório de Stagljar e co-inventor do manãtodo de teste.

Va¡rios testes sorola³gicos receberam aprovação regulata³ria com manãtodos baseados em ELISA como o padrãoouro quando se trata de medir a concentração de anticorpos como uma força da resposta imunola³gica individual. Mas écomposto por várias etapas laboratoriais que levam seis horas para serem conclua­das, o que o torna inadequado para um diagnóstico rápido. Manãtodos mais simples que usam tiras de teste, semelhantes aos testes de gravidez, fornecem resultados rápidos, mas não são quantitativos e são menos confia¡veis.

O novo manãtodo édenominado SATiN, para Ensaio Serola³gico baseado em Tripart Nanoluciferase dividida. a‰ o primeiro teste de sorologia COVID-19 que usa química de complementação de protea­na altamentesensívelem que uma protea­na luciferase emissora de luz éreconstitua­da a partir de fragmentos separados como leitura de teste .

Luciferase éinicialmente fornecido em fragmentos que não podem não brilhar por si pra³prios. Uma parte éanexada a  protea­na viral, cujos anticorpos se ligam para neutralizar o va­rus, enquanto outra éligada a uma protea­na bacteriana com a qual os anticorpos também interagem. Ao ligar-se simultaneamente a  protea­na spike do coronava­rus e a  protea­na bacteriana, o anticorpo ajuda a unir as pea§as da luciferase em uma molanãcula inteira. Segue-se um flash de luz cuja intensidade édetectada e convertida em concentração de anticorpos por um instrumento leitor de placas. Todos os reagentes podem ser preparados do zero e a granel e isso mantanãm o custo baixo.

Stagljar agora estãotrabalhando com o escrita³rio de propriedade intelectual da U of T e com a Toronto Innovation Acceleration Partners para encontrar parceiros da indústria que ajudem a tornar o manãtodo amplamente dispona­vel. Ele também estãocolaborando com o Dr. Prabhat Jha, Diretor do Centro de Pesquisa em Saúde Global do St. Michael's Hospital e professor da Escola de Saúde Paºblica Dalla Lana da Universidade de Toronto, que estãoliderando um estudo de longo prazo para estabelecer a duração da imunidade em 10.000 canadenses. Em outro projeto, Stagljar estãotrabalhando com a Dra. Allison McGeer, Cientista Cla­nica Saªnior do Sinai Health System e também professora da Dalla Lana, para avaliar os na­veis de anticorpos em pessoas após a vacinação.

"a‰ realmente útil ter essa capacidade quantitativa de saber qual éo status de anticorpos de alguém , seja de uma infecção passada ou de uma vacinação. Isso seráde importa¢ncia crucial para o pra³ximo esta¡gio da pandemia, especialmente agora, quando os governos de todos ospaíses começam com vacinações em massa com vacinas anti-COVID-19 aprovadas recentemente ", disse Stagljar.