Tecnologia Científica

Pesquisadores desenvolvem primeira plataforma eletroquímica para biologia sintanãtica sem células
Pesquisadores da Universidade de Toronto e da Universidade Estadual do Arizona desenvolveram a primeira interface direta gene-circuito-eletrodo, combinando biologia sintanãtica livre de células com eletrodos nanoestruturados de última geraça£o.
Por Kate Richards - 29/11/2019


Os membros da UTT da equipe interdisciplinar (da esquerda para a direita): Peivand Sadat Mousavi, Jenise Chen, Shana Kelley e Keith Pardee (foto de Steve Southon)

"Achamos que podemos realmente acelerar o campo e sua capacidade de melhorar vidas"


A interface, descrita em um estudo recente na  Nature Chemistry ,  combina a capacidade da biologia de sentir com os recursos de memória e tomada de decisão dos sistemas eletra´nicos.

Ha¡ muito inspirados em conceitos do campo da eletra´nica, os bia³logos sintanãticos procuram reprogramar sistemas biola³gicos para realizar funções artificiais para aplicações médicas, ambientais e farmacaªuticas.

"Este éo primeiro exemplo de um circuito genanãtico sendo diretamente acoplado a eletrodos, e éuma ferramenta interessante para a conversão de informações biológicas em um sinal eletra´nico", disse Keith Pardee , professor assistente da Faculdade de Farma¡cia Leslie Dan da Universidade de Toronto.

O esfora§o interdisciplinar para criar o novo sistema reuniu conhecimentos em biologia sintanãtica sem células do laboratório de Pardee, eletroquímica do laboratório da professora Shana Kelley da Universidade da Universidade de T  e projeto de sensores no laboratório de Alexander Green, professor assistente da Universidade Estadual do Arizona . 

Superando limites práticos de sinalização a³ptica

Pardee, cujo grupo de pesquisa éespecializado no desenvolvimento de tecnologias de diagnóstico sem células que podem ser usadas com segurança fora do laboratório, recebeu ampla atenção em 2016, quando ele e seus colaboradores lançaram uma plataforma para a detecção rápida, porta¡til e de baixo custo do va­rus Zika usando papel redes genanãticas sintanãticas baseadas em

Levar a capacidade de detectar o va­rus Zika fora da cla­nica ao ponto de necessidade foi um passo crucial, mas a abordagem se baseou na sinalização a³ptica convencional - uma mudança na cor para indicar que o va­rus havia sido detectado. Isso representou um desafio para a implementação prática empaíses como o Brasil, onde va­rus com sintomas semelhantes exigem que os profissionais de saúde rastreiem vários patógenos diferentes para identificar corretamente a causa da infecção de um paciente. 

Isso destacou a necessidade de um sistema porta¡til que pudesse acomodar muitos sensores no mesmo teste de diagnóstico, um recurso conhecido como multiplexação. O desafio era que a multiplexação com sinalização baseada em cores não é prática .

“Quando vocêultrapassa os sinais de três cores, fica sem largura de banda para detecção inequa­voca. Mudar para o espaço eletroqua­mico nos da¡ uma largura de banda significativamente maior para relatórios e sinalização. Agora mostramos que sinais eletroquímicos distintos podem operar em paralelo e sem diafonia, o que éuma abordagem muito mais promissora para aumentar a escala ”, disse Pardee.  

O novo sistema bio-ha­brido usa enzimas repa³rter não a³pticas contidas em 16 microlitros de la­quido, que emparelham-se especificamente com eletrodos microdados hospedados em um pequeno chip, com no ma¡ximo 2,5 cm de comprimento. Nesse chip, os sensores baseados em circuitos gaªnicos monitoram a presença de sequaªncias especa­ficas de a¡cidos nucleicos, que, quando ativadas, desencadeiam a produção de um dos painanãis das enzimas repa³rteres. As enzimas reagem com sequaªncias de DNA repa³rter que desencadeiam uma resposta eletroquímica no chip do sensor de eletrodo.

Peivand Sadat Mousavi , um candidato a PhD no laboratório de Pardee, adquiriu as enzimas individuais necessa¡rias para que a plataforma funcionasse.

"Criamos a interface redirecionando as enzimas normalmente encontradas no sistema imunológico bacteriano. As enzimas cortam o DNA como uma tesoura e éassim que as fazemos produzir sinais eletroquí­micos", disse ela.

Detectando genes de resistência a antibia³ticos

Como prova de conceito, a equipe aplicou a nova abordagem para detectar genes de resistência a antibia³ticos da colistina, que foram recentemente identificados em animais em todo o mundo e representam uma sanãria ameaça ao uso de antibia³ticos como tratamento de última insta¢ncia para a infecção. Foram detectados quatro genes de resistência separados, demonstrando a capacidade do sistema de identificar e relatar efetivamente cada gene de forma independente e também em combinação.

“O que torna essa abordagem combinada tão poderosa éque a conectividade subjacente das saa­das dos sensores do circuito genanãtico pode ser reprogramada a  vontade, modificando simplesmente o ca³digo noníveldo software e não no DNA, o que émuito mais difa­cil e demorado ”, disse Kelley, cujo grupo de pesquisa éespecializado no desenvolvimento de sensores eletroquímicos altamente sensa­veis.

Combinar o sensor baseado em biologia com a lógica eletra´nica, os elementos de memória e resposta tem o potencial de transformar medicina, biotecnologia, pesquisa acadaªmica, segurança alimentar e outras aplicações prática s, acrescentou Kelley.

Um kit de ferramentas poderoso para o futuro

"Este novo sistema nos permite detectar muitos sinais diferentes simultaneamente, o que éessencial para sistemas de diagnóstico e monitoramento", disse o co-autor Green do Instituto de Biodesign da Arizona State University. "A saa­da eletra´nica significa que, no futuro, ela podera¡ ser facilmente conectada a tecnologias como smartphones e matrizes sensoriais distribua­das que podem ser levadas diretamente para a cabeceira do paciente".

Pardee e seu grupo de pesquisa estãoentusiasmados em ver para onde outros no campo da biologia sintanãtica levara£o o sistema.

"Criamos essencialmente um novo conjunto de ferramentas e abrimos um novo local para sinalização", disse Pardee. "Com essa nova abordagem combinada, acreditamos que podemos realmente acelerar o campo e sua capacidade de melhorar vidas".

A pesquisa foi apoiada pelo Conselho de Pesquisa em Ciências Naturais e Engenharia do Canada¡ e os Institutos Canadenses de Pesquisa em Saúde, entre outros.

 

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